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即用稀釋液,用于減少HAMA(人抗小鼠抗體)、類風(fēng)濕因子、非特異性結(jié)合、交叉反應(yīng)和基質(zhì)效應(yīng)引起的干擾。
免疫分析中的干擾可導(dǎo)致檢測(cè)中產(chǎn)生假陽性和假陰性結(jié)果,各種干擾日益普遍的原因有很多:
● 人口老齡化
● 越來越多的患者患有慢性自身免疫性疾病、過敏性和炎癥性疾病
● 現(xiàn)有分析方法的檢測(cè)水平限制
● 更多夾心分析法的應(yīng)用
干擾可以根據(jù)其生化原因和對(duì)測(cè)定性能的影響分以下類:
1.病人樣本中抗體引起的干擾
例如患者樣本中的HAMA(人抗鼠抗體)、HAAA(人抗動(dòng)物抗體)、嗜異性抗體和類風(fēng)濕因子
2.樣本中內(nèi)源性成份引起的干擾
例如白蛋白、補(bǔ)體、溶菌酶、纖維蛋白原、α-1抗胰蛋白酶、非典型性高脂、高鹽、高糖等
3.測(cè)定成份引起的干擾
測(cè)定成份如熒光或酶標(biāo)記物,可以與樣本中的物質(zhì)發(fā)生交叉反應(yīng)或者改變檢測(cè)抗體的結(jié)合特性。
圖A: 沒有干擾的正常夾心分析結(jié)果→結(jié)果正確
圖B: 干擾抗體橋聯(lián)捕獲抗體和檢測(cè)抗體→假陽性結(jié)果
圖C: 干擾抗體與捕獲抗體結(jié)合→假陰性結(jié)果
圖D: Assay Defender?阻止干擾抗體結(jié)合→正確結(jié)果
Assay Defender?能夠有效地消除各種干擾,并有助于防止產(chǎn)生假陽性或假陰性結(jié)果。
Assay Defender?可以有效防止干擾樣品的假陽性結(jié)果
樣本1和樣本2是來自類風(fēng)濕性疾病患者的血清樣本,用Elisa實(shí)驗(yàn)檢測(cè)樣本中肝癌標(biāo)記物hAxl,樣本3是來自健康供體的無干擾樣本。樣本用PBS-T/BSA, LowCross-Buffer, 市面上商業(yè)化HAMA阻斷劑1,2,3,以及Assay Defender稀釋,實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)單獨(dú)使用Assay Defender?可以完全消除干擾,因此在兩種干擾樣本中都能得到真正的陰性結(jié)果(<25 ng/mL)。無干擾樣本的結(jié)果不受Assay Defender?的影響。
Assay Defender?的使用
Assay Defender?可用于使用捕獲和(或)檢測(cè)抗體的免疫分析,特別適用于人或動(dòng)物樣本中含有HAMA(人抗鼠抗體)或其他HAAA(人抗動(dòng)物抗體)的免疫分析。
Assay Defender?是一款用于人體或者動(dòng)物體液樣本的即用型稀釋液,使用簡(jiǎn)單,直接用Assay Defender?替代以前的稀釋液即可。校準(zhǔn)品也需用Assay Defender?稀釋。樣本稀釋比可以1:2或更高。大多數(shù)應(yīng)用的有效稀釋比為1:10(1份樣本+9 份Assay Defender?)
Assay Defender?的使用示例
1. ELISA檢測(cè)
Assay Defender?替代普通樣本稀釋液。樣本與Assay Defender?至少1:2稀釋,若有可能1:10(1份樣本+9份Assay Defender?)
如果分析物濃度高,可用更高稀釋度。Assay Defender?作為樣本稀釋液也適用于免疫PCR和蛋白質(zhì)芯片。
2. Lateral Flow Assay側(cè)向?qū)游鰴z測(cè)
Assay Defender?替代流動(dòng)緩沖液或淋洗液。
3. 帶樣本稀釋液的微球平臺(tái)
Assay Defender?替代普通樣本稀釋液,稀釋比取決于分析物的濃度。
4. 不帶樣本稀釋的微球平臺(tái)
Assay Defender替代捕獲和檢測(cè)微球的保存緩沖液。